鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer，RA)引起的一种接触性传染性疾病，又称为鸭传染性浆膜炎、新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合症等，是严重危害世界养鸭业的疾病，尤其在集约化养殖的国家发病率较高。该病一年四季均可发生，以气温高、湿度大的环境发病率和死亡率最高。商品肉鸭养殖常见于22~30日龄左右高发，各日龄鸭高度敏感，常由小日龄鸭群扩散到大日龄鸭群，小日龄鸭群发病急，死亡率偏高。 

肉鸭在感染RA后一般表现为全身性败血性、渗出性病理变化，剖检可见心包、肝脏和气囊的纤维素性渗出，输卵管中有大量的干酪性渗出物，脑膜充血和水肿，即特征性的纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎和脑膜炎；在感染的不同发展时期，其剖检变化有差异。临床上主要表现为仰翻卧地，两腿呈现划水状，行动迟缓。随着细菌的快速传播，肉鸭消瘦，死亡率升高，给养殖户造成巨大的经济损失。鉴于以上情况，鸭群出现异常时，应及时将死淘肉鸭送往实验室进行鸭疫里默式杆菌的分离鉴定，以便于根据检测结果及时制定疾病的防控和治疗方案，减少养殖户损失。

1.发病情况分析发病养殖户肉鸭为网上养殖，23日龄左右出现较多瘫鸭，剖检发现肉鸭出现明显心包炎、肝炎和气囊炎症状，疑似鸭疫，随即选取症状明显6只鸭头（RA在鸭头中分离率最高）送往实验室进行RA的分离鉴定。    

2.材料准备

TSB增菌液（添加5%小牛血清），血平板（商品化），PCR相关耗材、引物及扩增酶。

3.RA分离鉴定

3.1试验准备

实验室接样后，先对鸭头进行清洗，防止鸭毛乱飞；然后将鸭头放置操作台上，操作台需要提前铺上防水隔离材料，防止污染台面。操作台可选择通风橱内或者超净台内，操作时需要点燃酒精灯，并且在酒精灯附近10 cm左右进行RA的划线培养。

3.2细菌划线培养

使用灭菌剪刀将鸭头部的皮肤剪开，暴露出鸭头部颅骨，可以将鸭颅骨放置在火焰上灼烧，防止混入外源性细菌，然后使用灭菌剪刀将鸭的颅骨剪开一个小切口，将灭菌接种环从切口处插入，保证接种环上携带鸭脑组织，然后使用分区划线法（该方法适合于杂菌较多划线）接种于血平板中，操作时先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小区（第一区）内，约占平板1/5面积，再在二、三区依次连续划线。每划完一个区，均将接种环灭菌一次。每一区的划线均接触上一区的接种线2～3次，使菌量逐渐减少，以获得单个菌落，划线后将血平板放置于烛缸中厌氧培养18~24h。   

3.3细菌形态观察

对血平板上的菌落形态进行观察，一般RA在血平板上形态为：边缘整齐、透明有光泽，呈凸起状（见图4）。然后可以对疑似菌落可进行菌落PCR验证。

4.RA的PCR鉴定

为保障检测效率，在RA划线培养同时可以进行PCR验证，使用灭菌接种环划线后，可以再无菌取少量脑组织，放置于TSB液体培养基内，进行隔夜扩菌培养。第二天取扩增后的菌液进行PCR验证。    

5.RA血清型验证

对血平板上疑似菌落进行纯化培养，然后采用玻片凝集方法进行RA血清型验证。取常见阳性血清7型、10型、黑肺型（信得制备）各10 μL于干净载玻片上，挑取单菌落于各型血清中并用移液器混匀（保障较高的菌液浓度），观察分离菌株与阳性血清混合后3 min内是否出现颗粒状凝集，出现颗粒状凝集判定为阳性，不出现颗粒状凝集判定为阴性。

6.小结

综合分析肉鸭临床表现、血平板上疑似菌落形态、PCR鉴定结果及血清型验证结果，可判定本次肉鸭临床上出现RA感染，并且为黑肺型。提示：实验室诊断后需要及时与临床兽医沟通，以判断本区域是否出现新的血清型，如有需要可联系合作厂家定制相应鸭疫疫苗，以保障下批次的免疫效果。对于发生RA的养殖户，需要对其后续养殖批次持续监测上苗前、养殖过程中棚舍内设备表面、环境中以及肉鸭体内是否存在RA菌，一旦发病，需要同步采集鸭头、肝脏进行RA的分离鉴定，以确定是否出现血清型的变化，降低RA对于肉鸭临床的损失。